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考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精que的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。

1．Bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml 95%乙醇，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。

2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗ti，可用纯化的抗ti作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗ti作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。

3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(hao用PBS)。

4．按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。

5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．

6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。

纯度试验

（1）水不容物 小于0.20%。

（2）氯化物、***盐 以总量计，小于4.0%。

（3）*** 以Pb计，小于20ug/g。

（4 以As2O3计，小于4.0ug/g。

食用范围及使用量

我国《食品添加剂食用卫生标准》规定：可用于果汁饮料类、碳酸饮料、配制酒、糖果、糕点上彩妆；山东富舜新材料科技有限公司的诚信、实力和产品质量获得业界的认可。染色樱桃罐头、冰淇淋、冰棍、雪糕、果冻、油炸豆腐、膨化食品、风味酸奶、青梅、虾片，使用量0.025g/kg;用于糖果包衣，用量为0.05g/kg;用于红绿丝为0.10g/kg；用于固体饮料，0.2g/kg;用于绿芥末膏，0.01g/kg;用于可可玉米片，0.015g/kg

【应用】 根据我国《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-1996）中规定：亮蓝可用于果味型饮料（液、固体）、果汁型饮料、汽水、配制酒、糖果、糕点上彩装、红绿丝、罐头、浓缩果汁、青梅、对虾片，使用量为0.025g/kg；冰淇淋，使用量为0.021999g/kg。红绿丝的使用量可加倍；果味粉着色剂加入量按稀释倍数的50%加入。 英文名：BRILLIANT BLUE 产品标准编号：GB 7655.1 化学文摘号：CAS 3844-45-9 EINECS编号：EC223-339-8 分子式：C37H34N2O9S3Na2 化学名称：双[4-(N--N-3-磺酸苯甲基)氨基]-2-磺酸基二钠盐 规格：10kg 保质期为5年 【据中国《食品添加剂使用卫生标准》(GB2760－1996)规定：柠檬黄可用于果汁饮料、配制酒、糖果等食品而用量为0.1g/kg】 【使用方法】 将标准称量的本品置于容器中，逐渐加入适量温水，并不断搅拌使之全部溶解，所得溶液即可用于着色。可添加但限量记者在卫sheng部颁布的GB2760-2007《食品添加剂食品卫生标准》中看到，亮蓝是一种着色剂，在果酱、巧克力、糕点上彩装、碳酸饮料、果冻等20余种食品上有广泛使用。 使用过程中应注意尽量避免或减少酸、碱、氧化剂、还原剂、金属离子、微生物等物质的不良影响，并注意避免受高温与暴晒，以防腿色或变色。 【运输及贮存】 运输时须防潮、遮阳、应贮存于干燥阴凉处、贮运过程中不得与***、***物质混装、混运、混放。 【 其他狮头牌食用色素】 亮蓝、柠檬黄、苋菜红、番茄红、胭脂红、果绿、嫩叶绿、牛奶巧克力棕等18色食用色素。